阿維菌素類藥物殘留測定方法(四)
阿維菌素類藥物殘留測定方法(四)
[db:作者] / 2022-12-26 00:00(5)免疫分析法(immunoassay,IA)
IA與儀器方法不同,它具有高度的選擇性和靈敏度,可使分析過程簡化,適合復雜基質中痕量組分的分析,它的基本原理是利用抗原-抗體的特異性反應,AVMs分析中主要有酶聯免疫分析法(ELISA)、免疫傳感器法(immunosensor)等。
Schmidt等制備了抗IVM的單克隆抗體,可以同時識別IVM和AVM,標準曲線的50%抑制率時的待測物濃度IC50分別為3μg/kg和7ug/kg,然而該抗體并沒有作進一步的研究。Crooks等用結構改造后的IVM免疫兔子,制備了抗IVM的多克隆抗體,并以此建立了競爭ELISA方法,用于牛肝樣品中IVM的檢測。該方法LOD為1.6ng/g,批內和批間RSD分別為8.8%和14.6%。該ELISA方法與HPLC分析結果高度符合(r=0.99)。楊君宏等建立了一種間接競爭ELISA方法,檢測牛組織中的AVMs殘留。該方法可同時檢測牛肝臟和肌肉中的AVM、IVM和EPR殘留。該方法IC50為4.8ng/mL,線性范圍為1.1~21.9ng/mL;以20ng/mL、50ng/mL和100ng/g濃度添加時,回收率為53.8%~80.4%,CV為3.4%~17.9%;以5ng/mL、10ng/mL和20ng/g濃度添加時,回收率為70.9%~108.6%,CV為3.7%~17.1%。
Samsonova等利用IVM的單克隆抗體研制了基于表面等離子體共振(SPR)的光學生物傳感器,并用于牛奶中IVM的檢測。樣品用乙腈提取后,經C8柱凈化后,用該免疫傳感器檢測。該方法LOD為16.2ng/mL;在100和50ng/mL添加濃度的回收率分別為102.6%和103%。McGarrity等研發了一種基于競爭性化學發光免疫分析的生物芯片,并用于EPR、AVM、IVM和DOR等的篩查。該芯片固體支持物和容器是包含離散測試位點的生物芯片陣列,點樣后可用半自動的臺式分析儀檢測。牛奶中該方法的LOD為0.3~2ppb,組織為0.15~6.5ppb;回收率在71%~135%之間。
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